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流式细胞术数据分析难?样本处理要求高?你离成为高手就差这个课程

abcam 医麦客 2021-10-20
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2021年6月22日/医麦客新闻 eMedClub News/--抗体类药物因其靶向性、高度特异性、低毒性等优点成为临床治疗众多疾病的首选药物,自1986年美国FDA批准第一个单克隆抗体药物Muromonab‐CD3 (orthoclone OKT3, Janssen‐Cilag)以来,至今已经有超过100款抗体药物获得FDA批准。与此同时,全球抗体药物市场的节节攀升,据不完全统计,全球抗体药物2019年销售总额达到1592.7亿美元。


但是,抗体类药物在生物体内的处置机制有其特殊性和复杂性,极大地增加了生物检测的难度,因此必须建立灵敏、准确、可重复的测定方法。 在免疫分析方法中,通常需要精制的抗原以及特异性的单克隆抗体用于生物基质中被分析物的捕获与检测。


流式细胞术现在是被广泛应用于分析细胞表面和细胞内分子表达水平,从多样性的细胞群中分辨及界定不同的细胞种类,测定分离出的细胞亚群纯度,以及分析细胞的大小和总量。它可以同时分析单个细胞的多个参数。流式细胞术主要用于检测样本中所发出的荧光强度。这些荧光是由带有荧光标记用以检测蛋白的抗体,或与特定的细胞分子结合的配体所产生,如与DNA结合的溴化丙啶(PI)等。


染色步骤包括:将培养的细胞或组织样品制成单细胞悬液。然后将细胞放入管子或酶标板中与荧光标记或未标记的抗体孵育。最后将细胞放入流式细胞仪中进行分析。



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相比其他抗体检测技术,流式细胞术是一项强大的可精确定量的实验技术。同时,该技术对样品处理和数据结果分析要求较高,不容易快速上手。




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课程安排


第一课  了解您的流式细胞仪

✎ 流式细胞术简介

✎ 流式细胞仪

✎ 了解荧光基团

✎ 选择合适的荧光基团


第二课 样本制备和染色

✎ 样本制备

✎ 对照

✎ 直接染色与间接染色

✎ 细胞内染色


第三课 补偿和数据分析

✎ 实验设计

✎ 补偿

✎ 运行流式细胞术实验并可视化数据


第四课 疑难解答

✎ 疑难解答视频 —— 无信号/高背景

✎ 补偿、光谱重叠和溢出计算

✎ 解决遇到的其他问题

✎ 常见问题解答


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